Современные аналитические подходы к выявлению фальсифицированных лекарственных препаратов группы противомикробных средств из класса антибиотиков бета-лактамидов

После тщательной проверки правильности упаковки и маркировки препарата, проверяют его внешний вид: его соответствие описанию в инструкции, которая приложена к ЛП, а также полное соответствие фармакопейным требованиям по лекарственным формам. 4.2 Качественный анализХимическиесвойстваиреакцииподлинности.Наиболеелабильнойчастьюмолекулыпенициллинаявляетсяβ-лактамноекольцо,котороеподвергаетсягидролитическомурасщеплениюподдействиемщелочей,кислот,ферментапенициллиназыспотерейбиологическойактивности.Реакциящелочногогидролизапенициллиновиспользуетсявгидроксамовойреакции,вколичественномйодометрическомопределениипенициллинов.Щелочиипениниллиназагидролизуютβ-лактамноекольцособразованиемнеактивнойпенициллоиновой кислоты.Гидроксамоваяреакция.Гидроксамоваярекцияоснованананаличииβ-лактомногокольцавмолекулепенициллина.Привзаимодействиипинициллиновсощелочнымрастворомгидроксиламинагидрохлоридапроисходитреакциягидроксиламинолизасобразованиемгидроксамовойкислоты,котораяпослеподкисленияобразуетокрашенныекомплексныесолиссолямитяжелыхметаллов:ссолямижелеза(Ш)фиолетовогоцветарастворгидроксаматажелеза(III)изеленогоцветаосадокгидроксаматамеди(II):Образованиепенилловойипенициленовойкислот,ихиспользованиеванализе.Поддействиемкислотпенициллиныинактивируютсясобразованиемпенилловой(прирН2,0)ипеницилленовой(прирН5,0)кислот.Вобоихслучаяхна1-мэтаперасщепляетсяβ-лактамныйциклсобразованиемпенициллоиновойкислоты.Затемпроисходитконденсациякарбоксильнойилиамиднойгруппысгидроксильнойгруппойацильногорадикала:РеакциясреактивомМарки.ПенициллинысреактивомМарки(растворформалинавконцентрированнойсернойкислоте)образуютокрашенныепродукты.Наиболеехарактернойэтареакцияявляетсядляфеноксиметилпенициллина(красноеокрашиваниеприкомнатнойтемпературеиуглублениеокраскипринагревании).Реакцияпротекаетзасчетфеноксиуксуснойкислоты,котораяобразуетсяизфеноксиметилпенициллинапридействииконцентрированнойсернойкислоты.ФенолсреактивомМаркиобразуетауриновыйкрасителькрасногоцвета.Ампициллиниамоксициллинзасчетостаткааминокислотывацильнойчастимолекулыдаютреакциюснингидриномисолямимеди(II)(среактивомФедингаилираствороммедисульфата).Испытанияначистоту.Пенициллинымогутлегкоизменятьсяполвлияниемвнешнихвоздействий,поэтомудлянихобязательнымявляетсяиспытаниенапрозрачностьицветность.Всепрепаратыоптическиактивны(правовращающие).УФ-спектрофотометрияиспользуетсядляопределенияпостороннихпримесей.Поглощениепри320нмобусловленообразованиемтиольнойформыпенициллоиновойкислоты.Цефалоспорины являются кислотами (за счет карбоксильной группы в 4-м положении); некоторые из них применяются в виде натриевых солей (цефадотин). Цефалексин обладает амфотерными свойствами: кроме карбоксильной группы, содержит основную группу.Общие химические свойства цефалексина и цефалотина обусловлены наличием в их составе молекул атома серы (способность к окислению) и β-лактамного кольца (гидроксамовая peaкция).Реакцию окисления проводят 80% раствором H2SО4, которая содержит 1% азотной кислоты. Цефалексин образует желтое окрашивание, цефалотина натриевая соль - зеленое, переходящее в красновато-коричневое.Гидроксамовая реакция проводится по методике для пенициллинов. Цефалотин, кроме того, дает гидроксамовуго реакцию и на сложноэфирную группу. Гидроксаматы железа (III) красно-фиолетового цветаЦефалексин (как и ампициллин, амоксициллин) содержит в ацильной части молекулы остаток α-фениламиноуксусной кислоты и поэтому дает реакцию с нингидрином (вишневое окрашивание) и сульфатом меди после нейтрализации раствором гидроксида натрия (оливково-зеленое окрашивание).Водные растворы цефалоспоринов дают в УФ области характерную полосу поглощения с максимумом при длине волны около 260 нм.4.3 Количественный анализМетодыколичественногоопределения.Количественноеопределениепенициллиновпроводятйодометрическимметодом.Солибензилпенициллинарастворяютвводе,афеноксиметилпенициллин—вфосфатномбуфересрН7,0.Затемдобавляютрастворгидроксиданатрияиоставляютна20мин.Послещелочногогидролизаксмесиприбавляютсолянуюкислоту,растворацетатногобуфера(рН4,5)иизбыток0,01н.растворайода.Оставляютна20минвтемномместеититруютизбыток0,01н.растворайода0,01и.растворомнатриятиосульфата.Параллельнопроводятконтрольныйопытстакимжеколичествомпрепарата,нобезщелочногогидролиза.Прищелочномгидролизепроисходитраскрытиеβ-лактамногокольцасобразованиемпенициллоиновойкислотывоткрытойтиольнойформе.ПенициллоиноваякислотаприрН4,5гидролизуетеявприсутствииокислителя(йод)допенальдиновойкислотыипеницилламина,которыеокисляютсярастворомйодасоответственнодо дегидропенальдиновойипеницилламиновой кислоты.Природныепениииллины:грамположительныеиграмотрицательныекокки(заисключениемпенициллиназообразующихштаммовэпидермальногоизолотистогостафилококков,энтерококков),палочки(листерии,дифтерийная,сибиреязвеннаяпалочки),спирохеты(бледнаяспирохета,лептоспиры,боррелии),спорообразующиеанаэробы(клостридии),споронеобразующиеанаэробы(пептострептококки,фузобактерии),актиномицеты.Полусинтетические пенициллины:пенициллиназоустойчивыепенициллиныимеютспектрпротивомикробногодействия,аналогичныйтаковомуприродныхпенициллинов,атакжевоздействуютнапенициллиназообразующиестафилококки.Ампициллиниамоксициллинимеютаналогичныйприроднымпенициллинамспектрдействия,атакжедополнительновлияютнаэнтерококки,сальмонеллы,шигеллы,протей,кишечнуюпалочку,гемофильнуюпалочку.Карбенициллин,тикарциллин(карбоксипенициллины),азлоциллин,пиперациллин(уреидопенициллины)дополнительнодействуютнабактероиды(ввысокойконцентрации)инекоторыештаммысинегнойнойпалочки.Для количественного определения цефалоспоринов используют следующие методы:Определение активности микробиологическим методом с тест-культурой Bacillus subtilis в сравнении со стандартными образцами препаратов.Йодометрический метод так же, как для солей бензил пенициллина, с применением ацетатного буфера рН 4,7. Цефалоспорины согласно Европейской фармакопее определяют методом жидкостной хроматографии .ЗаключениеВ данной работе была достигнута цель данного исследования, которая заключалась в изучении современных аналитических подходов к выявлению фальсифицированных лекарственных препаратов группы противомикробных средств из класса антибиотиков бета-лактамидов.Были решены следующие задачи данного исследования:1)изучена проблема фальсификации лекарственных средств. Рассмотрели виды фальсификации, факторы, которые способствуют фальсификации;2)рассмотрен класс антибиотиков – бета-лактамиды: понятие, представители;Бета-лактамные антибиотики представляет собой группу антибиотиков, которых объединяет наличие в структуре β-лактамного кольца.К бета-лактамам относятся подгруппы пенициллинов, цефалоспоринов, карбапенемов, монобактамов.3) изучены современные аналитические методы выявления фальсифицированных лекарственных средств;Наиболее важными методами анализа чистоты лекарственных субстанций и препаратов в фармацевтическом анализе являются высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) и газожидкостная хроматография (ГЖХ).К экспресс-методам, в основном относятся: простые качественные реакции (окраска, осадок), ТСХ: сравнение со свидетелем; ИК спектроскопия в области 4000-400 см-1 (сравнение со стандартным ИК спектром)4) рассмотрены подходы к выявлению фальсифицированных лекарственных препаратовкласса антибиотиков бета-лактамидов. Изучили важные показатели упаковки и маркировки, потому что именно здесь обычно наблюдаются несоответствия упаковку, маркировку. Рассмотрели методы качественного и количественного анализа.Список литературыАрзамасцев А.П. «Фармацевтическая химия», Москва, «Гэотра-Мед», 2004 г.Арзамасцев А. П., Дорофеев В.Л. Выявления фальсифицированных лекарственных средств с использованием современных аналитических методов// Химико-фармацевтический журнал, т.38, 2004. №3.Арзамасцев А.П. Экспресс-анализ с целью выявления фальсифицированных лекарственных средств. Практическое руководство. М.: 2003.Арзамасцев А.П. Анализ лекарственных веществ из группы беталактамидов и аминогликозидов. М.: ММА, 2003.Беликов В.Г. «Фармацевтическая химия», Москва, МедПресс-Информ, 2007 г.Государственная фармакопея СССР - 10 изд. - М: Медицина ,1968 г.Государственная фармакопея СССР- 11изд, Вып 2 , 1989 г. Государственная фармакопея РФ – 12 изд., вып.1, 2007 г.Максимов С. В. «Фальсификация лекарственных средств в России», Юрайт, 2008 г. Ушкалова Е.А. Проблема фальсификации лекарственных средств: фокус на антимикробные препараты // Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. т. 7. 2005. № 2.