Современные аналитические подходы к выявлению фальсифицированных препаратов группы гормональных средств.

Зато для ИК–спектра преднизолона, как 3-кето-1,4прегнадиена присутствует полоса сильной степени интенсивностивалентных колебаний С = С связи при С1(1595 см-1).Таким образом, ИК–спектроскопия позволяет осуществитьидентификацию стероидов близкой структуры по положению основныхполос в спектре и их относительным интенсивностям.В фармацевтическом анализе для целей количественного определенияметод ИК–спектроскопии не нашел широкого применения из-затрудностей, не позволяющих добиться сопоставимой точности. К нимотносятся необходимость измерения в очень узкой кювете, длинукоторойтрудно воспроизвести; высокая вероятность перекрывания полоспоглощения; небольшая ширина полосы поглощения в максимуме, чтоприводит к отклонениям от основного закона светопоглощения.Также на подтверждение подлинности используют следующую методику. К 0,05 г субстанции прибавляют 2 мл спирта 96%, 2 мл серной кислоты концентрированной и кипятят в течение 1 мин.; выделяется этилацетат, обнаруживаемый по запаху. [9]Температура плавления должна быть в пределах 218 – 222˚С.Удельное вращение. От +158 до +167 град. в пересчете на сухое вещество (1% раствор субстанции в диоксане; раствор готовят при нагревании до кипения).Для установления подлинности и проведения испытаний на посторонние примеси ФС рекомендован также метод ТСХ.Методом ТСХ на пластинках Силуфол УФ-254 или Сорбфил устанавливают во всех лекарственных веществах наличие примесей посторонних стероидов. На пластинку помимо испытуемого раствора наносят стандартные образцы различных количеств стероидов, примеси которых обнаруживают. В состав подвижной фазы входят метиленхлорид, метанол, хлороформ, вода в различных соотношениях. Обнаружение пятен проводят в УФ-свете с длиной волны 254 и 365 нм. Проявителем может также служить фосфорномолибденовая кислота. Суммарное содержание примесей не должно превышать 2-4%. Методики фотоколориметрического определения гидрокортизона ацетата и других 3-кетостероилов основаны на использовании в качестве реактивов на кетогруппу при С-3 стероидного цикла: фенилгидразина, 4-аминоантипирина, изониазида, боргидрида натрия. Микроколоночную ВЭЖХ применяют для идентификации и испытаний на чистоту ряда кортикостероидов: дезоксикортона ацетата, кортизона ацетата, преднизона ацетата и преднизолона. Для анализа используют отечественный прибор «Миллихром» с УФ-детектором при 238 нм. Количественное содержание примесей устанавливают методом внутренней нормализации. Метод ВЭЖХ в прямофазном и обращеннофазном вариантах использован для количественного определения гидрокортизона ацетата и преднизолона в мазях. Для анализа на прямой фазе используют смесь хлороформ-метанол (93:3), на обратной — метанол. Для качественного и количественного анализа кортикостероидов и их аналогов используют спектрофотометрию в УФ-области. Расчет содержания лекарственного вещества выполняют по удельному показателю поглощения или (преднизолон) по оптической плотности ГСО. В таблице 3 приведены условия, в которых ФС рекомендуют выполнять испытания на подлинность и спектрофотометрическое определение лекарственных веществ, производных кортикостероидов. Таблица 3. Условия спектрофотометрического определения кортикостероидовЛекарственное веществоРастворительМаксимум поглощения, нмУдельный показатель поглощенияДезоксикортона ацетат Этанол241430-450Кортизона ацетат Этанол238390 ІГидрокортизона ацетат Этанол241395 1Преднизолон Метанол242400-430Ультрафиолетовый спектр поглощения раствора субстанции, приготовленного для количественного определения, в области от 200 до 300 нм должен иметь максимум при 241 нм.Определение посторонних примесей проводят методом ВЭЖХ.Приготовление испытуемого раствора: 0,025 г субстанции растворяют в 5 мл метанола и разводят подвижной фазой (ПФ) до 10 мл.Раствор сравнения. 1 мл испытуемого раствора переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора ПФ до метки и перемешивают.Раствор для проверки пригодности системы. 0,002 г субстанции и 0,002 г стандартного образца кортизона ацетата (стандарт ВР или аналогичного качества) растворяют в 40 мл ПФ.Условия хроматографирования Колонка - 25 x 0,46 см с октадецилсилил силикагелем (C18),5 мкм; ПФ - ацетонитрил - вода (40:60); Скорость потока - 1,0 мл/мин.; Детектор - спектрофотометрический, 254 нм; Объем пробы - 20 мкл.Хроматографируют раствор для проверки пригодности системы. Время удерживания пика гидрокортизона ацетата должно быть около 10 мин., пика кортизона ацетата - около 12 мин. Разрешение (R) между пиками должно быть не менее 4,0.Хроматографируют раствор сравнения не менее 5 раз. Относительное стандартное отклонение площади пика гидрокортизона ацетата не должно превышать 5%.Хроматографируют раствор сравнения и испытуемый раствор. Время регистрации хроматограммы испытуемого раствора должно не менее чем в 2,5 раза превышать время удерживания основного пика.Площадь пика любой посторонней примеси на хроматограмме испытуемого раствора должна быть не более площади пика гидрокортизона ацетата на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0%); сумма площадей всех пиков посторонних примесей не должна более чем в 1,5 раза превышать площадь пика гидрокортизона ацетата на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,5%).Потеря в массе при высушивании. Около 0,5 г (точная навеска) субстанции сушат при температуре от 100 до 105 град. C до постоянной массы. Потеря в массе не должна превышать 0,5%.Сульфатная зола и тяжелые металлы. Сульфатная зола из 1 г (точная навеска) субстанции не должна превышать 0,1% и должна выдерживать испытание на тяжелые металлы (не более 0,001% в субстанции).Наличие остаточных органических растворителей определяют в соответствии с требованиями ОФС «Остаточные органические растворители».Микробиологическую чистоту определяют в соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».Количественное определение. Около 0,05 г (точная навеска) препарата помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в 70 мл спирта 96% при нагревании на водяной бане, после охлаждения доводят объем раствора спиртом 96% до метки и перемешивают. 1 мл полученного раствора переносят в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводят объем раствора спиртом 96% до метки и перемешивают (испытуемый раствор).Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре в максимуме поглощения при длине волны 241 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм.В качестве раствора сравнения используют спирт 96%.Содержание С23Н32O6 в субстанции в пересчете на сухое вещество в процентах (X) вычисляют по формуле: [11]Содержание С23Н32O6 в субстанции в пересчете на сухое вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:A x 500000 X = ----------------------------- , A1%1см* a *x (100 - W)где:A - оптическая плотность испытуемого раствора; a - навеска субстанции, в граммах;A 1%1см- удельный показатель поглощения гидрокортизона ацетата при241 нм, равный 395; W - потеря в массе при высушивании, в процентах.ЗаключениеВ ходе написания реферативной работы были выполненные поставленные в начале задачи.Дано определение понятию «фальсификация», которое было представлено в 1992 году в едином документе ВОЗ и Международной федерации фармацевтических фирм-изготовителей. Также приведено понятие, которое трактует закон «О лекарственных средствах». Обращено внимание на то, что не стоит отождествлять понятия «контрафакт» и «фальсификат», так как первое характеризует лекарственные препараты, которые изготавливаются без должного разрешения патентодержателя, то есть предприятия-разработчика. Приведена классификация фальсифицированных средств. Сказанное выше показывает, что эффективность лекарственного препарата определяется действующим веществом.Охарактеризованы факторы, которые способствуют распространению фальсификата:1. Несоблюдение норм действующих нормативно-правовых актов.2. Неэффективная работа или отсутствие государственных органов, которые осуществляют контроль над работой фармацевтического сектора.3. Недостатки юридического регулирования системы фармацевтической дистрибуции. Слишком длинный путь проходит лекарственный препарат от производителя к потребителю, за счет большого количества посредников.Приведена классификация гормональных препаратов в зависимости от химической структуры и структурные формулы некоторых гормонов. Также составлена таблица некоторых представителей гормональных препаратов на фармацевтическом рынке с указанием наименований, лекарственной формы, производителя. Приведенные данные наглядно показывают, что гормональные препараты, представленные на фармацевтическом рынке, обладают широким спектром действия и выпускаются в различных лекарственных формах.Также приведены данные о некоторых фальсифицированных гормональных препаратах по сериям за февраль 2015.В работе обращается внимание на то, что при анализе должное внимание должно уделяться показателям упаковка и маркировка, так как по статистике именно тут чаще всего наблюдаются несоответствия. Приведен подробный перечень информации, которая указывается на первичной и вторичной упаковке лекарственных препаратов.Приведены методики определения доброкачественности, качественного и количественного состава на примере гидрокортизона ацетата.Литература1. Гопа А.А. Понятие и классификация фальсифицированных лекарственных средств // Бизнес в законе. – 2008. – с. 77 – 79.2. Юмашева И.П. Фармацевтический рынок. Проблема фальсификации лекарственных средств // Вестник ТГУ. – 2011. – Т. 16, вып. 3. – с. 897 – 903.3. ФЗ от 12.04.2010 № 61-ФЗ (ред. от 22. 10.2014) «Об обращении лекарственных средств» (с изм. и доп., вступ. В силу с 01.01.2015)4. Скибина К.П., Ананько С.Я. Информационно-фармацевтический анализ фальсифицированных лекарственных препаратов // Успехи современного естествознания. – 2013. - № 9. – с. 116 – 117.5. Третьякова Е.И. Причины и условия оборота фальсифицированных лекарственных средств на фармацевтическом рынке // УДК 343.98 – с. 125 – 136.6. Посылкина О.В., Хромых А.Г. Внедрение эффективных систем защиты фармацевтических логистических цепей от проникновения фальсифицированной продукции // Научные ведомости. Серия Медицинв. Фармация. – 2013. - № 18 (161). Выпуск 23. – с. 240 – 246.7. Кукес В.Г. Клиническая фармакология. 3 издание. – М.: ГЭОТАР-Медиа. – 2006. – с. 938.8. Налетов С.В., Бахтеева Т.Д., Казаков В.Н., Зупанец И.А. Клиническая фармакология и фармакотерапия. – Севастополь: «Вебер». – 2005. – с. 672.9. Беликов В.Г. Фармацевтическая химия: учебник по фарм. химии для студ. фарм. вузов и фак. В 2 ч.: - Пятигорск: Пятигорская гос. фарм. акад. - 2003. – с. 713.10. www.medbrak.ru11. Государственная Фармакопея Российской Федерации. Часть 1. – Москва. – 2007. – с. 576.12. Бидарова Ф.Н. Проблемы включения региональных экспертных испытательных лабораторий в систему государственного контроля качества лекарственных препаратов // Фундаментальные исследования. – 2013. - № 11. – с. 711 – 715.13. Демиденко М.П. Контроль качества субстанций для производства лекарственных средств // Вестник Росздравнадзора. –2009. - № 1. – с. 57 – 60.