1. Современные аналитические подходы к выявлению фальсифицированных лекарственных препаратов группы противомикробных средств из класса сульфаниламидов.

Для проведения качественного анализа используют следующие реакции.Реакция с нитропруссидом натрияРастворы сульфаниламидных препаратов в присутствии едких щелочей при добавлении 1 % раствора нитропруссида натрия и последующего подкисления минеральной кислотой образуют окрашенные в красный или красно-коричневый цвет растворы. Около 0,005 г препарата растворяли в 1 см3 воды, добавили около 0,1 см3 1 М NaOH и 1-2 капли 1 %-го растворов натрия нитропруссида. Наблюдают красное окрашивание.Реакция образования азокрасителяРеакция основана на взаимодействии препарата с раствором нитрита натрия в кислой среде с образованием хлорида диазония и его дальнейшей реакцией с фенолами с образованием красителя. К примеру, с β-нафтолом, образуется вишнёво-красное окрашивание.Рис. 6 Реакция образования азокрасителя.Реакция конденсации. С 2,4-динитрохлорбензолом образуется продукт желтого цвета, с альдегидами в солянокислой среде образуются Шиффовы основания желтого цвета. Лигниновая пробаРазновидностьобразования шиффовых оснований – это лигниновая проба -при нанесении на бумагу или дерево сульфаниламида или другого первичного амина и капли соляной кислоты появляется желтое окрашивание. Имеющиеся в лигнине альдегиды (п-оксибензальдегид, сиреневый альдегид, ванилин) с первичным амином образуют желтое шиффово основание.Реакцию с образованием оснований Шиффа используют для экспресс-анализа.Рис. 7. Реакция с образованием оснований Шиффа.Реакция галогенирования. Реакции галогенирования обусловлены наличием донорного заместителя первого рода и используется как для подтверждения подлинности так и для количественного определения (броматометрия, иодометрия, иодохлорометрия).Рис. 8. Реакции галогенированияРеакция пиролизаПиролиз дает продукты разного цвета и запаха. Стрептоцид образует плав фиолетового цвета и запах аммиака и анилина. Норсульфазол - плав темно-бурового цвета с запахом сероводорода. Сульгин и уросульфан - плав фиолетово-красного цвета и запах аммиака.Цветная реакция с солями тяжёлых металловС солями тяжелых металлов образуются внутрикомплексные соединения различной окраски, которые могут быть использованы для идентификации индивидуальных препаратов. Рекомендуют использовать реакцию с раствором хлорида кобальта при испытании на подлинность сульфадиметоксина. Образуется ярко-розовый с лиловым оттенком аморфный осадок. Сульфаниламид в таких условиях образует голубоватый с синеватым оттенком осадок, а сульфален приобретает голубое окрашивание.Рис. 9. Цветная реакция с солями тяжёлых металлов4.3 Количественный анализДля проведения количественного анализа используют следующие методики.НитритометрияОпределение содержания препаратов ряда сульфаниламидов в водных растворах методом нитриметрического титрования.Точную массу (около 0,25–0,50 г) анализируемого вещества растворяют в10–20 см3 воды и 10–30 см3 разведенной хлористоводородной кислоты. Далее добавляют воду до общего объема 80 см3, 1 г бромида калия и при постоянном перемешивании титруют лекарственный препарат 0,1 моль/дм3 раствором нитрита натрия, прибавляя его вначале со скоростью 2 см3 в мин, а в конце титрования (за 0,5 см3 до эквивалентного количества) – по 0,05 см3 через 1 мин. Титрование проводят, поддерживая температуру раствора 15–20 ºС, в некоторых случаях 0–5 ºС. При титровании применяют внутренние (нейтральный красный, тропеолин ОО) и внешний (иодкрахмальная бумага)индикаторы. 1 см3 0,1 М NaNO2 эквивалентен 0,01722 г стрептоцида (99 %).Рис.10 НитротометрияПротолитометрияОпределение содержания действующего вещества в препарате «Фталазол» вышеуказанным методом.Для этого 0,2 г вещества (точная масса) растворяют 20 см3 ДМФА (ранее нейтрализованным) и при постоянном перемешивании титруют 0,1 М раствором гидроксида натрия. Определениевыполняют при температуре не выше 18–20 °С.В качестве индикатора используют тимоловый синий. Титрование ведут до перехода окраскиот желтой к синей. 1 см3 0,1 М раствора гидроксида натрия соответствует 0,02017 г сульфацила-натрия, которого должно быть не менее 99,0 %.НейтрализацияМетод нейтрализации можно использовать для количественного определения норсульфазола-натрия, сульфацила-натрия, сульфапиридазина-натрия, которые образуют соли и натриевые соли сульфаниламидов. Особенность: подбор растворителя, т.к. образующиеся соли легко гидролизуются. Метод неводного титрования в ДМФА ФС рекомендуют для фталилсульфатиазола (фталазол) и салазодина (салазопиридазин), индикатор тимоловый синий, титрант - раствор щелочи в смеси метанола и бензола.Методика определения: Около 0,1 г препарата (точная масса) растворяют в 10 – 20 мл воды и титруют 0,1 раствором хлористоводородной кислоты.Индикатор – метиловый оранжевый (от желтого до оранжево-розового). Помимоэтого, метод нейтрализации можно использовать для количественного определения уросульфана, сульфадимезина, норсульфазола, фталазола, сульфапиридазина и других препаратов, используя в качестве растворителя воду, спирт или ацетон, а в качестве титранта 0,1 Н раствор едкого натра. Индикатор – фенолфталеин или смесь 3 частей 1% раствора фенолфталеина и 1 части 0,1% спиртового раствора тимолового синего.4.4 Испытания на чистотуВ сульфаниламидах определяют отсутствие или предельное содержание допустимых количеств органических примесей, сульфатов, хлоридов, сульфатной золы и тяжелых металлов, контролируют pH среды (кислотность или щелочность), прозрачность, цветность растворов. Гидраты (сульфацетамид натрия), стрептоцид, фталилсульфатиазол и салазодин подвергают проверке на потерю в массе при высушивании. Некоторые сульфаниламиды контролируют на содержание исходных продуктов синтеза. Так, по ФС во фталилсульфатиазоле определяют содержание примесей фталевой кислоты и норсульфазола. Определение этих примесей осуществляется титриметрическими методами. Фталевую кислоту титруют 0,1 М раствором гидроксида натрия в водном извлечении. Примесь норсульфазола (не более 0,5%) определяют нитритометрическими методами.Для испытания на посторонние органические примеси в сульфалене и сульфадиметоксине используют ТСХ на пластинках Силуфол или Армсорб УФ-254. После хроматографирования в необходимых условиях, должно просматриваться только 1 пятно, которое соответствует стандартному образцу свидетеля. Содержание примесей определяют по величине и интенсивности пятен соответствующих свидетелей, которые нанесены на ту же пластинку. Аналогичным методом устанавливают наличие посторонних примесей в стрептоциде и сульфацетамиде натрия. Устанавливают также микробиологическую чистоту сульфаниламидов.ЗаключениеВ данной работе была достигнута цель данного исследования, которая заключалась в изучении современных аналитических подходов к выявлению фальсифицированных лекарственных препаратов группы противомикробных средств из класса антибиотиков сульфаниламидов.Для достижения цели были решены следующие задачи данного исследования:1)изучена проблема фальсификации лекарственных средств. Рассмотрели виды фальсификации, факторы, которые способствуют фальсификации;Определили факторы, которые способствуют фальсификации лекарственных средств: несовершенство нормативно-правовой базы; некомпетентные национальные уполномоченные органы или их отсутствие; невыполнение требований действующего законодательства; недостаточно жесткие штрафные санкции; коррупция и конфликт интересов; сделки, в которые вовлечено большое количество посредников; спрос, который превышает предложение; высокие цены; совершенствование нелегального производства лекарств; неэффективное взаимодействие органов власти; неэффективное регулирование в экспортирующих странах и в зонах свободной торговли. Определили, следующие основные виды фальсификации: отличная имитация (копия) активного вещества и упаковки известной торговой марки; имитация препаратов, которая не содержит активное вещество или содержит его недостаточное количество; имитация препаратов, которая содержит другое активное вещество (не соответствующее указанному в маркировке); препараты, которые содержат загрязняющие или токсические вещества.2)рассмотрен класс антибиотиков – сульфаниламиды: понятие, представители; Определили, что сульфаниламиды- группа химических веществ, производные пара-аминобензосульфокислоты, которые находят широкое применение в фармацевтической практике. Представителями данного класса веществ являются стрептоцид, сульфацетамид натрия (сульфацил-натрий), сульфадиметоксин, сульфален, фталилсульфатиазол (фталазол) и пр.3) изучены современные аналитические методы выявления фальсифицированных лекарственных средств;Определили, что наиболее важные методы анализа чистоты лекарственных субстанций и препаратов в фармацевтическом анализе – это высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) и газожидкостная хроматография (ГЖХ).К экспресс-методам, в основном относятся: простые качественные реакции (окраска, осадок), ТСХ: сравнение со свидетелем; ИК спектроскопия в области 4000-400 см-1 (сравнение со стандартным ИК спектром)4) рассмотрены подходы к выявлению фальсифицированных лекарственных препаратов группы противомикробных средств из класса сульфаниламидов.Изучили важные показатели упаковки и маркировки, потому что именно здесь обычно наблюдают несоответствия упаковки, маркировки. Рассмотрели методы качественного и количественного анализа, испытания на чистоту.Список литературыАрзамасцев А.П. «Фармацевтическая химия», Москва, «Гэотра-Мед», 2004 г.Арзамасцев А. П., Дорофеев В.Л. Выявления фальсифицированных лекарственных средств с использованием современных аналитических методов// Химико-фармацевтический журнал, т.38, 2004. №3.Арзамасцев А.П. Экспресс-анализ с целью выявления фальсифицированных лекарственных средств. Практическое руководство. М.: 2003.Беликов В.Г. «Фармацевтическая химия», Москва, МедПресс-Информ, 2007 г.Буданцев Л.А. Разработка методик анализа для выявления фальсифицированных лекарственных средств:дис. … канд. фарм. наук. М., 2011. 178 с.Государственная фармакопея СССР - 10 изд. - М: Медицина ,1968 г.Государственная фармакопея СССР- 11изд, Вып 2 , 1989 г.Государственная фармакопея РФ – 12 изд., вып.1, 2007 г.Максимов С. В. «Фальсификация лекарственных средств в России», Юрайт, 2008 г.Ушкалова Е.А. Проблема фальсификации лекарственных средств: фокус на антимикробные препараты // Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. т. 7. 2005. № 2.