Организация микробиологической лаборатории

Этот процесс состоит из подвергания изделия воздействию температуры 62,8°C в течение 30 минут или 71,6°C в течение 30 минут. 15 минут, а затем немедленно охладить его.
b. При температуре 100 °C в кипящей воде или в свободном паре (все они стеклотары, металлические инструменты, иглы и шприцы) 2 способами, среда и растворы, на которые негативно влияет высокая температура в автоклаве (содержащие сахара, которые могут разлагаться при высокой температуре.)
c. При температуре выше 100 °C (насыщенный пар при повышенном давлении) как стерилизация в автоклавах. Эта процедура подходит для культурных сред, лабораторное покрытие, хирургическая повязка и водный раствор. Поскольку атмосфера пара предотвращают потерю воды за счет испарения во время нагрева. Основные режимы:
* 121 °C в течение 15 минут при давлении 15 фунтов на кв. дюйм.
*126 °C в течение 10 минут *126 °C
* 134°C 3 минуты
Радиация.
Процесс передачи энергии через пространство осуществляется ультрафиолетовым светом, рентгеновские лучи и гамма-лучи (рентгеновские лучи и гамма-лучи очень дорогие, поэтому он не доступен для использования, за исключением определенных условий.
Ультрафиолетовое излучение.
Одним из компонентов солнечного света является (ультрафиолетовое излучение). У него есть мощный бактерицидный эффект. Укороченная волна света достигает земли в длине 290 нм, но еще более эффективен. излучение 240-280 нм может быть произведено паровой лампой используются для уменьшения количество бактерий в помещениях и на экранах, где происходит асептическое обращение с материалами. Она обладает небольшой проникающей способностью, эффективна только для поверхности, на которых бактерии не защищены другими материалами. Меры предосторожности должны быть приняты для защиты кожи и роговицы от очень раздражающих лучей.
УФ-излучение вызывает следующие изменения в клетке:
1. Денатурация белка.
2. Повреждение ДНК.
3. Ингибирование репликации ДНК.
B. Механические методы (фильтрация):
Микроорганизмы могут быть удалены из растворов и жидкостей следующим образом фильтрации. Эти растворы являются стерильными. Этот метод используется стерилизации растворов и жидкостей, которые не могут быть подвержены воздействию тепла или химикатов без химически изменены.
Фильтры с размером пор 0,2 мкм в диаметре удаляют бактерии, и микроорганизмы, отличные от вирусов. Фильтры с пористостью 10 нм рекомендуется для удаления вирусов. Фильтрация используется для удаления методом фильтрации микроорганизмов из биологической жидкости (обычные сыворотки, антисыворотки, микробные токсины, ферменты, содержащие раствор, различные сахарные растворы, и другие материалы, помещенные в раствор, который не может быть стерилизован другими веществами)
C. Химические методы:
Химический агент, убивающий патогенные и непатогенные микроорганизмы, но не споры. Дезинфекция и антисептик обычно применяются в следующих случаях различные типы веществ, они не могут убивать все типы микроорганизмов, но уменьшай нет, чтобы не влиять или не вызывать болезни.
Дезинфекция: снижает количество бактерий до достаточно низкого уровня, что болезнь не могла возникнуть. Следует отметить, что споры и некоторые бактерии могут выжить. Например, этиловый спирт используется в концентрации (50-70%), фенольная группа (2-5%), соединения хлора 5% (добавлено в воду), формальдегид (газ), 37% детол или спирт 70% эффективны на вегетативные клетки (денатурация белковых и нуклеиновых кислот, растворителей липидов в клеточной мембране и активных веществ в снижении нормальной флоры с кожи и клинических термометров).
Антисепстики: разрушение или ингибирование мигренейших организмов в живом организме ткани, тем самым предотвращая их вредное воздействие. В практике до сих ор используются: 2% йод, 3% H2O2, перманганат калия [16, 21].
Таким образом, если рассматривать вопрос развития стерилизации и дезинфекции в работе микробиологической лаборатории, то можно отметить, что за последние десятилетия, несмотря на развитие химической промышленности и появления новых дезинфиктантов на рынке, в обычной российской практике используются прежние методы стерилизации и дезинфекции.


§ 3.4. Правила работы с автоклавом
Автоклавирование является наиболее эффективным и надежным средством стерилизации лабораторных материалов. Автоклавирование стерилизует материал с использованием насыщенного пара под давлением («влажное тепло»). Из-за использования давления, пара и высоких температур существует значительный риск получения травм, поэтому важно, чтобы люди были надлежащим образом обучены эксплуатационным процедурам. Автоклавы могут использоваться для стерилизации оборудования / продуктов перед использованием в эксперименте или для обеззараживания предметов перед их утилизацией. В руководстве по биологически опасным отходам говорится, что культуры, чашки и пузырьки, содержащие патогенные организмы, должны быть автоклавированы до утилизации [12, 14, 15]. Внешний вид автоклава представлен на рисунке 6.

Рисунок 6 – Автоклав Jiangsu, Китай
Причиной автоклавирования инфекционных отходов является то, что они должны обрабатываться несколько раз во время транспортировки; надлежащая локализация и обработка в источнике снижает вероятность случайного воздействия. Необходимая обработка для достижения стерильности будет варьироваться в зависимости от объема обрабатываемого материала. Следует отметить, что автоклавирование опасных материалов может привести к образованию токсичных паров или взрывоопасных сред.
Каждый автоклав и стерилизатор должны регулярно проверяться и обслуживаться. Это поможет обеспечить правильную работу оборудования [2, 21].
Каждый блок должен иметь стандартную рабочую процедуру, написанную достаточно подробно, чтобы операторы могли правильно использовать оборудование; средства управления различаются в зависимости от марки, каждая из которых имеет уникальные характеристики нагрузки, требования к размеру нагрузки, а также настройки и типы циклов. Главные исследователи и / или руководители лабораторий должны убедиться, что пользователи должным образом обучены работе с используемым автоклавом. Единицы следует регулярно проверять с помощью коммерческого препарата, содержащего споры Geobacillus stearothermophilus (биологический индикатор), в частности, любую единицу в установке BSL3.
Ленточные индикаторы (автоклавная лента) с термочувствительными химическими индикаторами должны использоваться в каждой загрузке автоклава. Примечание: индикаторы только подтверждают, что автоклав достиг нормальной рабочей температуры; они не указывают на то, что содержимое нагревалось в течение соответствующего периода времени или при надлежащем давлении. Следовательно, ленточные индикаторы не могут быть использованы для доказательства того, что организмы действительно погибают во время автоклавного прогона.
Необходимо вести подробные записи о биологических тестах, регистрации термометров и сервисных работах, выполненных на устройстве.
Отходы высокой плотности или материалы, которые изолируют агенты от проникновения тепла и пара, не подходят для стерилизации паром. Элементы, покрытые грязью или пленкой, требуют дополнительного времени хранения. Важность правильной чистки предметов, подлежащих стерилизации, нельзя переоценить.
Отходы в автоклаве могут вызывать неприятные запахи, использование дезодораторов в автоклаве может помочь, если есть общие проблемы в этой области.
Соответствующие средства индивидуальной защиты (СИЗ). Следующие СИЗ должны использоваться при погрузке и разгрузке: стандартная лабораторная одежда, включая длинные брюки и туфли с закрытыми носками, защита глаз / лица, перчатки (включая термостойкие перчатки), лабораторный халат.
Мешки для автоклавирования. Надлежащая упаковка и защита от инфекционных материалов имеют решающее значение для эффективной стерилизации. Наиболее частой причиной неудачи стерилизации является отсутствие контакта между паром и микроорганизмами. Сухой материал должен быть отделен от жидкого материала для достижения надлежащей стерилизации.
Сухой материал. Необходимо использовать только утвержденные пакеты для автоклава, и они не заполнены более чем на 75% вместимости. Большинство пакетов, которые продаются как автоклавируемые, не подходят, если они закрыты, потому что пар не проникает в них. Паронепроницаемые мешки должны быть оставлены открытыми или иметь отверстия, пробитые в верхней части, чтобы обеспечить проникновение пара. Не переносите открытые пакеты в автоклав. Никогда не закрывайте пакеты в автоклаве с напечатанным предупреждением о том, что они должны оставаться открытыми во время стерилизации. Если воздух остается в мешке, материал может быть не стерилизован должным образом. Мешки в автоклаве, которые обеспечивают проникновение пара, имеют тенденцию таять или разрушаться в процессе стерилизации; Автоклавируемые пакеты также могут протекать, поэтому их следует помещать в неглубокую кастрюлю из нержавеющей стали. Пластиковые сковороды менее эффективны, потому что они не передают тепло так быстро и эффективно [7, 11].
Жидкий материал. Для предотвращения разрушения бутылок во время наддува и для облегчения проникновения пара, крышки бутылок и пробки должны быть ослаблены после помещения в камеру. Если их оставить в запечатанном виде, они могут быть не стерилизованы должным образом и могут сильно взорваться при воздействии сильной жары. Не переполнять контейнеры (25-50% вместимости) во избежание разлива и кипения. Бутылки / колбы могут быть помещены в автоклав с 5-10 дюймов воды для равномерного нагрева, убедитесь, что под бутылкой / колбой нет пузырьков. Стерилизация сыпучих жидкостей требует особой осторожности для предотвращения взрыва контейнеров. Не обрабатывайте автоклав в массе без соблюдения письменных инструкций производителя. Каждый галлон инфекционной жидкости должен автоклавироваться в течение одного часа при 121 ° C при 15 фунтах на квадратный дюйм. Крышки и крышки должны быть ослаблены перед стерилизацией. Сыпучие растворы должны стерилизоваться отдельно от всех других предметов в загрузке, предназначенной только для жидкостей. Растворы подвергаются циклу, предназначенному специально для жидкостей. Стерилизованные жидкости должны быть охлаждены перед разгрузкой. Удаление горячих бутылок может привести к их взрыву.












ЗАКЛЮЧЕНИЕ
В фармацевтической и медицинской промышленности лаборатория микробиологии часто является побочным продуктом лаборатории аналитической химии. К сожалению, лаборатория микробиологии часто вытесняется в небольшое пространство, оставшееся после того, как лаборатории контроля качества было назначено две или три большие комнаты. Проблемы и риски микробиологических анализов и их влияние на качество продукции и безопасность пациентов недооцениваются или игнорируются. Это не преднамеренно, но это происходит из-за недостаточного понимания и понимания микробных наук, поскольку микроорганизмы не видны невооруженным глазом. 
В результате часто не хватает места для отделения «грязных» видов деятельности, таких как обработка микробной культуры и тестирование роста, от «чистых действий», таких как тестирование бионагрузки или пробы воды. Технологические потоки часто неадекватны, что создает риск перекрестного загрязнения, и холодильники, инкубаторы и другие области хранения удваиваются для хранения стерильных сред, тестируемых образцов перед тестированием, а также бактериальных уклонов и пробирок, ожидающих использования в тесте стимулирования роста. Из-за каких производственных моментов иногда образцы бывают загрязнены в лаборатории и появляются ложноположительные результаты исследований. Хорошо известно, насколько сложно проводить исследования отклонений микробных данных и выявлять первопричину. Результаты аналитического микробиологического анализа могут быть трудно интерпретировать по нескольким важным причинам: микроорганизмы являются повсеместными в природе, и распространенные загрязнители окружающей среды - особенно организмы, связанные с людьми - преобладают во многих типах микробиологического анализа; всегда есть потенциал для введения загрязняющих организмов во время обработки проб или обработки в лаборатории;  микроорганизмы не могут быть однородно распределены в образце или окружающей среде; микробиологические анализы подвержены значительной изменчивости результатов. Таким образом, лабораторные исследования должны проводиться с предельной осторожностью, чтобы избежать экзогенного загрязнения. Конструкция лаборатории микробиологии требует особого внимания в связи с характером исследуемого материала. При проектировании и организации лаборатории микробиологии необходимо обратить внимание на следующие общие характеристики микроорганизмов. Микроорганизмы являются невидимыми, вездесущими по природе, переносятся людьми и животными, растут и быстро адаптируются к окружающей среде. Лаборатории должны разработать методы управления с высоким потоком образцов, меры предосторожности для предотвращения выброса микроорганизмов в окружающую среду и механизмы предотвращения проникновения микроорганизмов в асептически защищенные зоны. Первоначальный проект микробиологической лаборатории должен учитывать физическое разделение помещений для выполнения функций и удовлетворения требований безопасности, охраны окружающей среды и других требований. Микробиологические лаборатории должны проектироваться и обслуживаться с учетом требований cGMP. При разработке лаборатории микробиологии и подготовке макета важно определить тип анализов, которые будут выполняться, требуемую работоспособность лаборатории, площадь оборудования, количество персонала, занятого в тестировании, услуги (электричество, вода, газ) требуется, и механизм контроля непреднамеренного выброса микроорганизмов в окружающую среду, а также перекрестного загрязнения. Другими словами, необходимо обеспечить контроль за состоянием окружающей среды, чтобы избежать загрязнения тестируемых материалов, разбавителей и сред. Кроме того, должно быть место для будущего расширения. Другим важным аспектом современных микробиологических лабораторий является внедрение принципов бережливого дизайна в его дизайн и макет. Хорошо известно, что дизайн, расположение и размещение лабораторий оказывают существенное влияние на лабораторные процессы, поведение и коммуникации. Хороший дизайн будет активно поддерживать бережливые процессы, включая поток, визуальное управление, качественную работу, а также превосходство на рабочем месте. Реализация принципов бережливого производства позволит сократить время выполнения работ, сократить избыточность, исключить расточительные шаги и улучшить качество. Это позволит лабораторному персоналу работать умно, а не усердно, поскольку реальная цель бережливости - максимизировать ценность, сводя к минимуму все расточительные практики. Хотя лаборатории не то же самое, что производственные среды, Бережливое производство может быть реализовано путем тщательной адаптации методов, основанных на глубоком понимании лабораторных процессов. Планировка лабораторий и зон поддержки должна способствовать разумному потоку материалов, разделению различных видов деятельности и разумной практике утилизации отходов. При проектировании лаборатории микробиологии контроля качества важно учитывать природу микроорганизмов, потенциальные источники перекрестного загрязнения, природу тестируемых материалов, а также нормативные требования в фармацевтической и медицинской промышленности. Сбор и сбор данных являются ключом к обеспечению качества продукции и безопасности пациентов.
Таким образом, в данной работе была проведена оценка организации микробиологической лаборатории, которая показала, что несмотря на общие требования, которые используются и по настоящее время, в микробиологическую практику входит все больше современных технологий.






СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ
Алешукина А. В. Медицинская микробиология: учебное пособие для вузов/А. В. Алешукина. – Ростов-на-Дону: Феникс, 2011. – 437 с.
Василькин В. М. Методические указания к лабораторным занятиям по технологии хранения и переработки растениеводческой продукции/В. М. Василькин, В. И. Каргин, Д. А. Костин, И. П. Бектяшкин. Саранск: 2006. – 38 с.
Ветеринарная микробиология и иммунология /Н. А. Радчук, Г. В. Дунаев, Н. М. Колычев и др.; под ред. Н. А. Радчука. – М.: Агропромиздат, 1991. – 383 с.
Градова Н. Б. Лабораторный практикум по общей микробиологии/Н.Б. Градова и др. – М.: ДеЛи принт, 2001. – 131 с.
Емцев, В.Т. Микробиология: учебник для вузов/В.Т. Емцев, Е.Н. Мишустин. – 6-е изд., испр. – М.: Дрофа, 2013. – 444 с.
Лаптев С. В. Микробиология: учебное пособии/С. В. Лаптев, Н. И. Мезенцева, Е. П. Каменская и др.; Алт. гос. техн. ун-т, БТИ. – Бийск: Издво Алт. гос. техн. ун-та, 2012. – 319 с.
Мудрецова-Висс К. А. Микробиология, санитария и гигиена: учебник / К. А. Мудрецова-Висс, В. П. Дедюхина. – 4-е изд., испр. и доп. –М.: ИД «ФОРУМ»: ИНФРА-М, 2009. – 400 с.
Павлович С. А. Микробиология с микробиологическими исследованиями: учебное пособие/С. А. Павлович. – Минск: Вышая школа, 2009. – 502 с.
Практикум по микробиологии: Учеб. пособие для студ. высш. учеб. заведений/А.И. Нетрусов, М.А. Егорова, Л.М. Захарчук // Под ред. А. И. Нетрусова. – М.: ИЦ «Академия», 2010. – 608 с.
Шлегель Г. Общая микробиология / Г. Шлегель. – М.: Мир, 1987. – 567 с.
WHO Handbook: good laboratory practice (GLP): quality practices for regulated non-clinical research and development - 2nd ed. ISBN 978 92 4 154755 0.
WHO Good Manufacturing Practices for Pharmaceutical Products: Main Principles. WHO Technical Report Series, No. 961, 2011, Annex 3.
ISO 7218:2007 (Amd2:2013), Microbiology of food and animal feeding stuffs – General requirements and guidance for microbiological examinations.
ISO/TS 19036:2006 (Amd1:2009), Microbiology of food and animal feeding stuffs – Guidelines for the estimation of measurement uncertainty for quantitative determinations.
ISO 19458:2006 Water Quality – Sampling for microbiological analysis.
August M.J. et al. Quality control and quality assurance practices in clinical microbiology. Cumitech, 1990, 3A:1–14. Basics of quality assurance for intermediate and peripheral laboratories, 2nd ed. Alexandria, WHO Regional Office for the Eastern Mediterranean, 2000.
Baron E.J., Finegold S.M. Diagnostic microbiology, 8th ed. St Louis, MO, The C.V. Mosby Company, 1990.
Blazevic D.J. et al. Practical quality control procedures for the clinical microbiology laboratory. Cumitech, 1976, 3:1–12.
Cheesbrough M. Medical laboratory manual for tropical countries. Vol. II: Microbiology. London, Tropical Health Technology/Butterworths, 1989.
Collins C.H., Lyne P.M. Microbiological methods, 5th ed. London, Butterworths, 1985.
Miller J.M. Quality control in microbiology. Atlanta, GA, Centers for Disease Control and Prevention, 1987.


















ПРИЛОЖЕНИЕ
Приложение 1
























Приложение 2





Приложение 3








42